Медач Medical Channel

​​Технология редактирования генома CRISPR-cas9 стала прорывом в области молекулярной биологии. Раньше подобные системы редактирования нуждались в тщательно подобранном для конкретного гена дизайне. Теперь, благодаря CRISPR, исследователю достаточно изменить sgRNA (направляющую РНК), чтобы внести разрез в нужную ему последовательность ДНК, и вставить новую последовательность в место разрыва. Благодаря простоте использования CRISPR превратила редактирование генома чуть ли не в рутинную лабораторную практику. Однако у этого метода имеется важная недоработка - внецелевая активность CRISPR. Дело в том, что CRISPR может привести к появлению новых непредсказуемых мутаций в некоторых клетках, культура которых подвергалась редактированию. Строго говоря, ошибается не CRISPR, а сама клетка, восстанавливая внесенный системой разрез в процессе репарации ДНК. Если во время разрезания ДНК рядом нет гомологичной матрицы (или клетка "не заметила" ее), репарация разреза идет по пути негомологичного соединения концов ДНК. В место разрыва не вставляется донорская последовательность, как это происходит при гомологичной репарации. Вместо этого концы разреза просто снова сшиваются вместе, и не всегда абсолютно точно.

Читать далее: http://medach.pro/news-post/1619